注射用硫酸多粘菌素B用于肌肉注射，需要分为3次注射。每天的剂量按照公斤体重1万~2万单位计算，用适量注射用水或氯化钠注射液溶解后应用。用于静脉滴注时，需要分成2次用药，每天50万~100万单位，以适量氯化钠注射液或葡萄糖注射液溶解和稀释后应用。用于鞘内注射时，儿童每天0.5万~2万单位，儿童每天0.5万~2万单位，3~5天后改为隔日1次，疗程为2~3周，用适量氯化钠注射液溶解后使用。